Esta técnica se realizó en secciones de tejido congelado. La exposición de tejido que contiene lípidos a los disolventes tales como alcohol conduce a la pérdida de los lípidos. Después de cortar el tejido sobre un portaobjetos cargado, para evitar el lavado de, se deja secar antes de la técnica se lleva a cabo. Aceite rojo O tiñe las grasas rojo mediante el uso de una solución alcohólica mancha ya que esto es más soluble en los lípidos que en el alcohol que conduce a la absorción de grasas por mancha. Esto se llama solubilidad selectiva.
- Cortar secciones frescas de tejido congelado a 5-10 um de espesor y montar en las diapositivas.
- Air diapositivas secos para 30-60 minutos a temperatura ambiente y luego se fijan en el hielo frío formalina al 10% durante 5-10 minutos. Deje secar al aire de nuevo durante otros 30-60 minutos o lávense inmediata en 3 cambios de agua destilada.
- Dejar desliza secar al aire durante unos minutos. li>
- Colocar en propilenglicol absoluta durante 2-5 minutos para evitar el transporte de agua en aceite rojo O.
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- Manchas en solución Oil Red O precalentado durante 8-10 minutos en el horno 60 ºC. li>
- Diferenciar en solución propilenglicol 85% durante 2-5 minutos. li>
- Enjuague con 2 cambios de agua destilada. li>
- Manchas en hamatoxylin de Gill o de Mayer durante 30 segundos. li>
- Lavar a fondo con agua corriente del grifo durante 3 minutos. li>
- Coloque los portaobjetos en agua destilada. li>
- Mount con gelatina de glicerina u otro medio de montaje acuoso li>
Resultado
lípidos |
Rojo |
Núcleos |
Azul pálido |
Foto - x10 aceite rojo sobre el tejido no fijado congelado
